Le Musée d'Art Sacré est situé à l'intérieur de l'Église de Sant'Agostino, qui a fait l'objet d'une réorganisation en 2017 grâce à un legs testamentaire. En plus de l'ensemble d'origine de l'église, laissé intact, des vitrines et d'autres peintures provenant des églises du territoire de Volterra ont été placées.

L'exposition rassemble principalement des œuvres provenant de la Cathédrale de Volterra et d'autres églises de la ville, et est composée, en plus de peintures, d'objets liturgiques tels que des reliquaires, des meubles et des objets divers.

Parmi les tableaux se distinguent la Vierge en majesté entre les Saints Jean-Baptiste et Barthélemy peinte par Rosso Fiorentino et la magnifique toile représentant l’Annonciation de Benvenuto de Giovanni, datée de 1466, et le buste reliquaire en argent et cuivre doré, attribué à Antonio del Pollaiolo, représentant le Saint ermite Ottaviano.

En plus de la nef principale, le musée se trouve également à gauche de l'autel, où l'on peut admirer, entre autres, un tableau du volterran Baldassarre Franceschini représentant les Saints Thomas de Villanova et Claire de Montefalco et un important livre enluminé du 1300.