La célèbre Annonciation (1533 - 1535), l'un des chefs-d'œuvre absolus du Maître, a été créée pour la Confrérie des Marchands de Recanati. La représentation de l'événement religieux de l'Annonciation est très fréquente dans l'histoire de l'art mais en l'occurrence la connotation que lui attribue Lorenzo Lotto est certainement nouvelle et particulière, sinon révolutionnaire. Les raisons qui rendent cette Annonciation unique par rapport à toutes les autres sont essentiellement au nombre de deux : l'attitude singulière de la Vierge, qui au lieu d'être tournée vers l'Ange, comme le veut la tradition, regarde effrayé le spectateur en quête presque de réconfort et de consolation, et la présence d'un chat, au centre de la scène, symbole du mal mais en même temps aussi élément ironique et ambigu, qui s'enfuit effrayé face à l'arrivée de l'Ange envoyé par Dieu le Père. Il convient de noter la description des détails de la pièce, clairement d'inspiration nordique.