Dans un paysage pâle et automnal, une file d'aveugles marche lentement : un fossé les attend dans lequel ils tomberont sans secours. La parabole évangélique - lorsqu'un aveugle en entraîne un autre, on les voit tomber tous les deux dans le fossé - devient pour le grand peintre le prétexte de représenter une humanité variée et abandonnée, étudiée avec un détail caricatural dans lequel chaque personnage assume une expression conditionnée par la position qu'il occupe : tragiquement effrayé celui qui tombe dans le fossé, hébété et inconscient de son dernier rang. Chef-d'œuvre de la phase de maturité, la fine toile de lin est signée et datée 1568 en bas à gauche. En arrière-plan, au loin, l'église du village de Pede de Saint-Anne, près de Bruxelles, est représentée. L'œuvre a toujours été considérée, avec le Misantropo, comme l'un des chefs-d'œuvre de la collection Farnèse.