La obra notable que representa la Inmaculada Concepción, una pintura al óleo sobre lienzo (aprox. 209x152 cm) de finales del siglo XVI, fue donada al Museo diocesano por Mons. Pietro Amato y atribuida por él a Juan de Roelas (Flandes ca. 1570 - Olivares 1625) clérigo presbítero pintor. Este precioso regalo representa un gesto de cariño de Mons. Amato hacia Molfetta, su ciudad natal, a la que siempre ha estado unido, a pesar de que el Señor lo llamó a ejercer el ministerio sacerdotal en todo el mundo. El precioso lienzo, obra de uno de los artistas más destacados de la pintura sevillana de finales del siglo XVI y principios del siglo XVII, ha sido colocado en la sala de la Pinacoteca antigua. Un signo que expresa el apego a las raíces ligadas al nacimiento de Mons. Amato y a su formación. Molfetta es la ciudad donde la vocación presbiteral dio sus primeros pasos, iluminada por figuras importantes como su madre, Vincenza Immacolata Facchini, y don Cosmo Azzollini, quienes con su ejemplo y testimonio marcaron para siempre la vida de don Pietro, como hombre y como sacerdote. Y es en ocasión del CX aniversario del nacimiento de su querida madre que don Pietro quiso ofrecer la obra que representa a la Virgen Inmaculada, la cual casi representa una oración material dirigida a la Madre celestial en sufragio de la terrenal.

El artista representa con un lenguaje inusual una iconografía inédita y espléndida de la Inmaculada Concepción. La Sine macula, del tipo Tota Pulchra, está representada en medio de lenguas de fuego, una iconografía que apela al zarzal bíblico de Moisés, zarzal que ardía pero no se consumía (Ex. 3,2). Juan de Roelas presenta el atributo mariano con una imagen serena, llana, persuasiva. El zarzal ardiente y purificador, llama que no consume, está representado como el contenedor ideal para la Inmaculada Madre de Dios. La lectura iconológica de los numerosos símbolos presenta la figura de la Inmaculada en sus diferentes aspectos: palma victoriosa; olivo triunfante; vid; ciprés que anuncia la muerte; lirio; rosa, cuya belleza es intacta y pura. Torre de marfil y alta. Ciudad de Dios a la que se llega a través de la puerta del cielo.

Roelas representa la Sine macula, como Nueva Eva, la Madre de los vivientes: es la Virgen que pisotea a la serpiente, con la manzana mortífera en la boca y las pupilas dilatadas y enrojecidas por el sufrimiento; es la Mujer apocalíptica, con los pies sobre la media luna y la cabeza coronada por doce estrellas; es la Purísima, con la túnica blanca estrellada, el manto azul y la cabeza cubierta por un leve velo, que se agita al soplo crepitante; es la delicada y tierna doncella de Nazaret, realizada según los repertorios iconográficos post-tridentinos. Los demás atributos marianos están dispuestos a los lados. En el lado izquierdo, de abajo arriba: el espejo, el jardín cerrado, la fuente, la torre de marfil, la palma y el ciprés; en el lado derecho: el pozo, el cedro, la puerta del cielo y la ciudad de Dios.

El contenido de la figura central de la pintura, rico en doctrina y erudición, revela características propias de un artista culto, refinado e incluso elegante. La atribución de la obra a Juan de Roelas proviene precisamente de estos indicios de naturaleza cultural y pictórica. Es un Roelas joven, que cambiará mucho a lo largo de su extensa producción, especialmente después de un posible viaje a Italia, en particular a Venecia, que se cree que ocurrió después del siglo XVII. El ductus pictórico y la iconografía, especialmente la aureola con las doce estrellas, son herencia del siglo XVI y evocan una tradición renacentista italiana, revisitada y mantenida viva por pintores flamencos y españoles que han frecuentado Italia central y meridional. Roelas tuvo contactos con estos pintores y con este entorno dominado por ideas artísticas arcaizantes, de carácter manierista.